【艾思瑞導(dǎo)讀】

慢性胰腺炎（Chronic pancreatitis，CP）是由基因、環(huán)境等因素引起的胰腺組織和功能不可逆改變的慢性炎癥性疾病，其病理改變主要包括腺泡細(xì)胞萎縮、慢性炎癥和胰腺間質(zhì)纖維化，其中胰腺纖維化是慢性胰腺炎的特征性病理改變。

【胰腺纖維化】

研究發(fā)現(xiàn)肝星狀細(xì)胞活化在肝纖維化中起著關(guān)鍵作用，而對(duì)肺纖維化的研究集中在巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等炎癥細(xì)胞上。目前研究證實(shí)胰腺星狀細(xì)胞（pancreatic stellate cell，PSC）是胰腺纖維化的關(guān)鍵細(xì)胞，活化的PSC可分泌細(xì)胞外基質(zhì)促進(jìn)纖維化發(fā)生、發(fā)展。

【動(dòng)物實(shí)驗(yàn)】

該實(shí)驗(yàn)由來(lái)自美國(guó)阿拉巴馬大學(xué)伯明翰分校的研究團(tuán)隊(duì)主持，選用6-8周齡、體重22.5-25g的C57BL/6J小鼠，飼養(yǎng)在無(wú)特定病原體的微隔離器下，利用多種蛋白誘導(dǎo)慢性胰腺炎模型。

然后，將小鼠分為吡非尼酮組和生理鹽水組，每日灌胃。在吡非尼酮治療后的第3、7、14和21天處死小鼠，評(píng)估小鼠的早期組織學(xué)、mRNA水平和免疫細(xì)胞的變化。

【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】

結(jié)果一：吡非尼酮可以逆轉(zhuǎn)纖維化并改善胰腺萎縮。

如上圖所示，在慢性胰腺炎（CP）模型建立后，開(kāi)始給予吡非尼酮。

如上圖所示，胰腺與體重的比率顯示，吡非尼酮治療組的小鼠顯著增加，說(shuō)明吡非尼酮改善了CP小鼠模型的胰腺萎縮。

如上圖所示，C組代表H&E切片的胰腺組織學(xué)以及組織學(xué)評(píng)分，顯示經(jīng)吡非尼酮治療后胰腺組織學(xué)恢復(fù)正常；D組代表經(jīng)天狼星紅染色及纖維化定量顯示，治療組胰腺膠原沉積減少，可見(jiàn)纖維化逆轉(zhuǎn)；E組代表作為星形細(xì)胞激活的標(biāo)記物，波形蛋白在吡非尼酮處理后的免疫組化表達(dá)下降。

結(jié)果二：吡非尼酮可以通過(guò)抑制M2巨噬細(xì)胞增殖來(lái)改善慢性胰腺炎。

M2巨噬細(xì)胞已被證明參與慢性胰腺炎（CP）的發(fā)病機(jī)制，因此，研究團(tuán)隊(duì)評(píng)估了吡非尼酮對(duì)CP模型的巨噬細(xì)胞M2表型影響。

如上圖所示，研究團(tuán)隊(duì)分別用IL-4和IL-13（各20 ng/ml）與吡非尼酮、及不加吡非尼酮處理巨噬細(xì)胞(0.5 mg/ml) 24小時(shí)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，吡非尼酮降低了M2標(biāo)記物和促纖維化IL-4的表達(dá)。

如上圖所示，為了進(jìn)一步確定巨噬細(xì)胞在吡非尼酮有益作用中的關(guān)鍵作用，研究團(tuán)隊(duì)在已建立的l-精氨酸慢性胰腺炎模型中，使用氯膦酸脂體誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞。

如上圖所示，使用氯膦酸脂體誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞后，吡非尼酮改善胰腺萎縮的有益作用消失，說(shuō)明吡非尼酮可以通過(guò)抑制M2巨噬細(xì)胞增殖來(lái)改善慢性胰腺炎。

結(jié)果三：吡非尼酮降低胰腺星狀細(xì)胞的膠原分泌、細(xì)胞因子表達(dá)和纖維化標(biāo)志物。

由于胰腺星狀細(xì)胞(pancreatic stellate cells, PSCs)在胰腺纖維化中起著關(guān)鍵作用，研究團(tuán)隊(duì)接下來(lái)在體外評(píng)估吡非尼酮對(duì)胰腺纖維化的影響。

如上圖所示，吡非尼酮減少TGF-b激活的PSCs的膠原分泌（A）；在蛋白水平上降低了PSCs中的a-SMA、波形蛋白和纖維連接蛋白的表達(dá)（B）。

如上圖所示，吡非尼酮可降低PSCs中纖維化標(biāo)志物(膠原蛋白I、a-SMA、纖維連接蛋白、desmin等)和細(xì)胞因子(IL 1b、IL 6、IL 12a、IL 4和IL 18)的信息水平表達(dá)。

如上圖所示，在體外實(shí)驗(yàn)中，使用的吡非尼酮?jiǎng)┝?/span>(0.5 mg/ml)，不影響PSCs的活力。

【研究結(jié)論】

通過(guò)模擬持續(xù)的胰腺刺激構(gòu)建慢性胰腺炎小鼠模型，進(jìn)而證明吡非尼酮可以通過(guò)改變巨噬細(xì)胞極性，改善急性胰腺炎反復(fù)發(fā)作引起的持續(xù)性損傷，并且該研究還發(fā)現(xiàn)吡非尼酮可以逆轉(zhuǎn)胰腺纖維化和萎縮，降低胰腺纖維化的促進(jìn)因子的表達(dá)水平。

基于吡非尼酮治療慢性胰腺炎的良好結(jié)果，相關(guān)的臨床前試驗(yàn)已獲得了FDA的批準(zhǔn)。未來(lái)，吡非尼酮（以艾思瑞為主要代表藥物）可能成為一種新的治療嚴(yán)重胰腺纖維化和胰腺萎縮的藥物，相關(guān)的后續(xù)研究和臨床研究結(jié)果值得期待！

【參考文獻(xiàn)】

林曦, 王丹, 胡良皞. 慢性胰腺炎胰腺纖維化機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 海軍軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào), 2022, 43(3):6.

Bava E P, George J, Iyer S, et al. Pirfenidone ameliorates chronic pancreatitis in mouse models through immune and cytokine modulation[J]. Pancreatology, 2022, 22(5): 553-563.